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干細胞治療1型糖尿病長期效果:6例患者3年內(nèi)實現(xiàn)胰島素獨立

2022年8月18日,四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院聯(lián)合四川省人民醫(yī)院在期刊《中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志 》上發(fā)表了一篇關(guān)于《同種異體胰島聯(lián)合自體外周血干細胞移植治療1型糖尿病:隨訪3年的臨床研究》的臨床研究成果。

同種異體胰島移植治療1型糖尿病10例及隨訪觀察3年的臨床研究

研究結(jié)果表明,隨訪3年,6例患者完全撤除胰島素治療,4例患者胰島素用量較術(shù)前減少60%以上。術(shù)后血糖穩(wěn)定維持在正常水平,C肽均在正常范圍內(nèi),糖化血紅蛋白基本正常,肝腎功能穩(wěn)定維持正常,無胰島移植并發(fā)癥發(fā)生。

什么是1型糖尿病?

糖尿病(DM)是當今全球范圍內(nèi)對人類健康構(gòu)成重大威脅的一種慢性疾病,其影響廣泛且深遠,不僅限于血糖水平的異常升高,還包括對全身多個器官系統(tǒng)的微血管造成的損害。

尤其是1型糖尿?。═1DM),這種類型的糖尿病多發(fā)于兒童和青少年時期,起病通常非常突然,病情進展迅速。T1DM是由免疫系統(tǒng)錯誤地攻擊并破壞了胰腺中負責生產(chǎn)胰島素的β細胞所引起的,導(dǎo)致患者體內(nèi)幾乎完全喪失了胰島素的生產(chǎn)能力。

目前,盡管外源性胰島素替代療法能夠有效控制1型糖尿病患者的血糖水平,但它并不能完全阻止糖尿病對全身多器官微血管的損害,并且患者在治療過程中仍然面臨酮癥酸中毒、低血糖昏迷等嚴重并發(fā)癥的風險。

相比之下,胰島移植作為一種更為直接的方法,自2000年Edmonton方案提出以來,已被視為可能治愈1型糖尿病(T1DM)的有效途徑之一。據(jù)全球統(tǒng)計數(shù)據(jù),至今已實施超過1500例臨床胰島移植手術(shù),術(shù)后5年內(nèi)約有超過一半的受者實現(xiàn)了無需依賴外源性胰島素的目標。然而,長期隨訪結(jié)果顯示,胰島移植的遠期療效并不盡如人意,許多患者最終還是需要重新開始胰島素治療

近年來的研究表明,干細胞療法具有為移植后的胰島細胞提供一個有利于定植和存活的微環(huán)境的獨特優(yōu)勢。基于這一發(fā)現(xiàn),四川省人民醫(yī)院的研究團隊將胰島移植與自體干細胞療法相結(jié)合,開發(fā)了一種新的治療方法——同種異體胰島聯(lián)合自體干細胞移植,旨在提高移植胰島細胞的存活率及功能持久性,這項研究術(shù)后已隨訪3年,現(xiàn)將3年的研究結(jié)果進行報道。

干細胞治療1型糖尿病長期效果:6例患者3年內(nèi)實現(xiàn)胰島素獨立

本次研究回顧性收集2017年1月至2019年12月期間我院實施的同種異體胰島細胞聯(lián)合(或不聯(lián)合)自體外周血干細胞移植受者的臨床病理資料。

方法:經(jīng)皮經(jīng)肝門靜脈穿刺方式移植同種異體胰島細胞聯(lián)合(或不聯(lián)合)干細胞,術(shù)后采用改良的Edmonton免疫抑制方案,隨訪3年,分析移植術(shù)后受者的胰島素使用、C肽水平及糖化血紅蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)濃度情況。

結(jié)果

本次研究共納入完成同種異體胰島細胞移植10例,其中單獨同種異體胰島細胞移植(簡稱單獨組)受者5例,同種異體胰島細胞聯(lián)合自體外周血干細胞移植(簡稱聯(lián)合組)受者5例。(見表1)

表1:2組TIMD受者的基本情況

01.胰島的分離與純化結(jié)果

所有10例供胰均成功分離出胰島細胞(見圖1),胰島計數(shù)42.5×104~55.0×104IEQ、平均 49.7×104
IEQ;胰島純度40.7%~65.0%、平均51.2%;胰島活性為95.0%~97.2%、平均96.6%;刺激指數(shù)為
2.7~5.6、平均4.1。所有胰島細胞經(jīng)細菌革蘭染色、細菌培養(yǎng)、真菌培養(yǎng)及支原體檢測均為陰性。

圖1示修剪后的供體胰腺(a)及消化過程中顯微鏡下所見的胰島(b,x400)

02.移植胰島和干細胞數(shù)量及胰島素使用情況

移植胰島和干細胞使用情況:10例受者的移植胰島數(shù)量和自體干細胞移植數(shù)量(見表2)。

  • 移植胰島數(shù)量在單獨組為47.0×104~53.0×104IEQ、(50.60±2.51)×104IEQ,在聯(lián)合組為 42.5×104~55.0×104 IEQ、(48.70±4.76)×104 IEQ。
  • 干細胞移植數(shù)量為5.6×107~12.8×107個、(9.2±2.6)×107個。

胰島素使用情況:10例受者術(shù)后在正常飲食下嚴格控制血糖在7.8mmol/L 以下,其術(shù)前(圖表中以“0”表示)及術(shù)后36個月內(nèi)不同時間點所需胰島素用量(見表2和圖2a)。

  • 從表2可見,單獨組和聯(lián)合組受者術(shù)后第12個月時分別均有3例撤除胰島素,至術(shù)后第36個月時單獨組和聯(lián)合組受者分別有2例和3例撤除胰島素
  • 從圖2a可見,術(shù)后不同時間點的胰島素用量均較術(shù)前下降,2組的變化趨勢基本一致,在術(shù)后12個月內(nèi),聯(lián)合組胰島素用量呈現(xiàn)出低于單獨組的趨勢。
表2:10例受者移植胰島和(或)干細胞數(shù)量及胰島素使用情況
圖2 示單獨組和聯(lián)合組受者移植前后胰島素用量(a)、空腹及餐后2hC肽水平(b)及 HbA1c(c)變化情況

03.術(shù)后糖代謝情況

術(shù)后C肽水平的變化:術(shù)后3年內(nèi)10例患者的空腹和餐后2h的C肽水平(見表3及圖2b)。

  • 術(shù)后36個月內(nèi),10例患者的C肽水平均為陽性(空腹或餐后2h>0.6μg/L)??崭辜安秃?h的C肽水平在術(shù)后不同時間點均較術(shù)前升高。
  • 空腹C肽水平,單獨組在術(shù)后第24個月時達最高、聯(lián)合組于術(shù)后第12個月時達最高,然后開始下降,且單獨組下降趨勢更明顯而聯(lián)合組下降趨勢更平穩(wěn)且逐步上升。
  • 餐后2h的C肽水平,2組均于術(shù)后第12個月時達最高,然后開始下降,單獨組下降趨勢更明顯而聯(lián)合組下降趨勢更平穩(wěn)且逐步上升。

術(shù)后糖化血紅蛋白(HbA1c)的變化:術(shù)后36個月內(nèi)10例受者的HbA1c(見表3及圖2c)。

  • 術(shù)后不同時間點均較術(shù)前下降,至術(shù)后第6個月后基本維持正常平穩(wěn)水平,2組的變化趨勢基本一致。
表3 10例受者手術(shù)前后不同時間點C腦水平及 HbAlc結(jié)果

04.糖尿病相關(guān)并發(fā)癥及手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥情況

  1. 24h尿蛋白變化:在24小時尿蛋白方面,單獨組中病例2和4的初始定量分別為2.36g和1.2g,在術(shù)后36個月時分別降至1.06 g和0.6g。聯(lián)合組中,病例8、9和10的初始24小時尿蛋白定量為1.88g、1.0g和1.46g;至術(shù)后36個月時,這些數(shù)值分別下降至0.5g、小于0.15g和0.82g
  2. 眼底病變改善:眼底病變方面,單獨組的病例1和5從術(shù)前的Ⅱ級病變在術(shù)后36個月時好轉(zhuǎn)至Ⅰ級,而病例2的Ⅳ級病變未見明顯改善。聯(lián)合組中,病例9由術(shù)前的Ⅰ級病變恢復(fù)至正常,病例8從Ⅳ級好轉(zhuǎn)至Ⅲ級,病例10則從Ⅱ級改善到Ⅰ級。
  3. 手術(shù)相關(guān)并發(fā)癥:兩組受者在整個住院及隨訪期間,通過彩色多普勒超聲檢查均未發(fā)現(xiàn)肝臟或門靜脈系統(tǒng)的異常,肝腎功能保持正常,且沒有出現(xiàn)酮癥酸中毒、嚴重低血糖等癥狀。此外,術(shù)后也未觀察到急性排斥反應(yīng)或感染等移植相關(guān)的并發(fā)癥。

討論

干細胞在糖尿病領(lǐng)域有臨床應(yīng)用前景,研究證實胰島與骨髓間充質(zhì)干細胞聯(lián)合移植對大鼠T1MD遠期療效,胰島移植手術(shù)有多種優(yōu)點,自體外周血干細胞也有諸多優(yōu)勢。本研究采用同種異體胰島聯(lián)合自體外周血干細胞移植治療T1MD,術(shù)后用改良Edmonton免疫抑制劑方案,結(jié)果顯示聯(lián)合組的C肽水平在術(shù)后12個月達到峰值,單獨組在24個月才達到,且36個月時聯(lián)合組C肽水平下降不明顯,單獨組呈下降趨勢;術(shù)后12個月兩組均有3例患者撤除胰島素,36個月時聯(lián)合組撤除胰島素病例多于單獨組,且聯(lián)合干細胞移植未增加免疫排斥反應(yīng)和不良反應(yīng)。

聯(lián)合干細胞移植效果良好可能是因為:

  • ①干細胞增強胰島β細胞胰島素分泌功能,通過轉(zhuǎn)移線粒體保證能量代謝、分泌細胞外基質(zhì)成分影響胰島生存和功能;
  • ②促進胰島移植物再血管化,分泌細胞因子通過Wnt信號通路加快血運重建;
  • ③具有較強免疫調(diào)節(jié)作用,免疫原性低,可調(diào)節(jié)免疫細胞亞群來調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答水平;
  • ④調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,雖機制尚不明確,但可能通過分泌相關(guān)因子減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激。

結(jié)論

總之,胰島移植及干細胞移植是近年來糖尿病領(lǐng)域較有研究前景的治療方式。本次發(fā)布的臨床研究報告展示了我國科學(xué)家們在攻克1型糖尿病難題上取得的重要成就,同時也為全球范圍內(nèi)該病的治療帶來了新的希望。我們期待著后續(xù)研究能夠帶來更加確切的數(shù)據(jù)支持,從而推動這一前沿技術(shù)早日應(yīng)用于臨床實踐之中。

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參考資料:

姚豫桐,賴春友,馮天航,等.同種異體胰島聯(lián)合自體外周血干細胞移植治療1型糖尿病:隨訪3年的臨床研究[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2022,29(09):1189-1194.

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